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70例阴道分泌物与血清配对样品HIV抗体检测结果分析

时间:2018-10-12 13:51 文章来源:http://www.lunwenbuluo.com 作者:黄卫彤 , 黄炜 , 覃 点击次数:

    【摘要】目的 比较阴道分泌物和血清样品HIV抗体检测结果,探讨阴道分泌物样品检测HIV抗体的可行性。方法 应用血清学方法,对70例阴道分泌物与血清配对样品进行HIV抗体检测。比较阴道分泌物与血清样品的阳性符合率、阴性符合率及30例阴道分泌物与血清 HIV抗体阳性配对样品的含量、WB抗原带型。结果 70例阴道分泌物与血清配对样品的阳性符合率、阴性符合率均为100%。30例阴道分泌物样品的HIV抗体阳性含量低于血清样品的HIV抗体阳性含量(P<0.01)。WB实验显示,与阳性血清配对的阴道分泌物样品至少出现gp160和p 24两条带型。结论 阴道分泌物可以作为HIV抗体检测的实验样品。对妇科女性生殖道感染患者的HIV筛查,有其重要的应用价值。
  【关键词】阴道分泌物与血清配对样品 HIV抗体 HIV筛查
   人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染者体内的血液、精液、脑脊液、阴道分泌物、尿液等都含有可检测到的HIV抗体。目前,HIV实验室初筛主要是检测抗体,最常用的样品是血清或血浆,唾液或尿液有时也可作为检测样品[1]。但阴道分泌物作为HIV抗体检测样品国内尚未见有报道。本文应用血清学方法,对70例阴道分泌物与血清配对样品进行了HIV抗体检测,并比较分析,旨在探讨阴道分泌物样品检测HIV抗体的可行性。结果报告如下。
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  材料和方法
  1.标本采集和处理
  阴道分泌物与血清配对样品被检者均为经本人同意的妇科、性病科或HIV抗体阳性者70例,年龄19岁~55岁。首先用无菌棉拭子插入宫颈口旋转 3~4圈,并停留10 s,然后取出宫颈分泌物,再取阴道侧壁分泌物放入盛有1 ml无菌生理盐水试管内,将棉拭子上分泌物洗入无菌生理盐水试管后,取出棉拭子,将试管内分泌物无菌生理盐水混匀,离心10 min,取上清液放入另一支无菌试管中加盖,同时采集同一人的血清样品3 ml,两种标本一起置-20℃冰箱保存。所有样品在同一条件下检测。
  2.主要试剂及结果判定标准
  HIV?1/2第3代ELISA,为珠海丽珠试剂有限公司生产,批号200668;WB DiagnosticHIV Blot 2·3试剂,为新加坡Genelabs公司生产,批号AE6016。结果判定样品的OD 值≥1为HIV1/2抗体阳性, <1为HIV1/2抗体阴性。
  3.统计学处理
  计量资料以均数±标准差(-?±s)表示,组间比较采用t检验,P<0.05为有显著性差异。
  结 果
  1.阴道分泌物与血清配对样品检测符合率比较  70例阴道分泌物与血清配对样品HIV抗体阳性和阴性符合率皆为100%,见表1。表1  70例阴道分泌物与血清配对样品HIV抗体阳性和阴性符合率(略)快速发表论文
  2.阴道分泌物与血清配对HIV抗体阳性样品含量比较
  30例阴道分泌物样品HIV的平均含量为7.52±2.27,血清样品HIV的平均含量为9.97±2.32,两者比较有显著性差异(t=4.132,P<0.01)。提示阴道分泌物样品的HIV抗体含量低于血清样品的HIV抗体含量。
  3.阴道分泌物与血清配对HIV抗体阳性样品WB阳性结果
  从WB实验反应强度来看,阴道分泌物阳性样品至少出现包膜抗原gp120和核心抗原p24 两条阳性带型,5例其它阳性带型与血清样品一样,OD值高的阴道分泌物样品与血清样品一样均出现阳性带型, 尤其是gp120和p24两条带型均为强阳性,OD值低的阴道分泌物样品,gp120和p24两条带型出现较弱(见表2、图1)。按艾滋病诊断标准[1],30例阴道分泌物样品与血清配对样品均可确认为HIV?1型病毒感染。表2  30例阴道分泌物与血清配对HIV抗体阳性样品WB阳性结果(略)
  讨论
  从本次WB实验结果分析,70例阴道分泌物与血清配对样品阳性与阴性符合率及30例阴道分泌物与血清配对阳性样品符合率为100%,Belec L等[2]报道采用IgG ELISA试剂盒检测HIV抗体,敏感性为97.7%,特异性为97.6%,说明阴道分泌物HIV抗体阳性检出率与血清阳性检出率结果一致性高,可作为 HIV筛查的实验样品。有研究证实[3,4],通过性传播感染HIV患者不断增多,女性生殖道感染(如细菌性、淋球菌感染)者容易感染HIV,已感染 HIV的性病患者也易将HIV传予他人,而且HIV在女性生殖道可单独复制,接触阴道分泌物感染HIV的危险性很高,因此宫颈、阴道炎患者是国家防治 HIV的重点检测的高危人群之一,女性生殖道感染者采集阴道分泌物做常规检查的同时做HIV抗体检测,对患者为无创伤采样、简便易接受,对这些特定的高危人群和某些特殊情况下,进行艾滋病筛查有重要应用价值。
  本次实验对30例阴道分泌物与血清配对HIV抗体阳性样品的OD值进行比较,结果为阴道分泌物的HIV抗体含量低于血清HIV抗体含量。HIV 含量高的阴道分泌物在WB实验反应中显示p24和gp120的抗原条带为强阳性,其它抗原带型弱于血清样品, HIV含量低的阴道分泌物在WB实验反应中显示p24和gp120抗原条阳性带型较弱于血清样品。所有样品中都至少出现gp120和p24两条带型,25 例阴道分泌物样品中WB显示的其它抗原阳性条带与血清样品不同,其中酶抗原p31出现最少。从实验结果进行总体分析30例阴道分泌物HIV抗体阳性者,均符合HIV?1型病毒感染诊断标准。Belec L等[5]从一名血清HIV抗体阴性被强暴妇女的阴道分泌物及阴道分泌物混合液中检测出HIV抗体阳性,为评价艾滋病感染的危险性和采取紧急预防措施提供了实验依据。可见,采集阴道分泌物样品检测HIV抗体,可为HIV筛查及个案诊断提供比较可靠的辅助诊断依据。
  参考文献: 
    [1]中国疾病预防控制中心.全国艾滋病检测技术规范(2004年版)[S],2004,1-7.
  [2]Belec L,Gresenguet G,Dragon MA,et al.Detection of antibodies to human immunodeficiency virus in vaginal secretions by immunoglobulin G antibody capture enzyme-linked immunosorbent assay: application to detection of seminal antibodies after sexual intercourse[J].J Clin Microbiol,1994,32(5):1249.
  [3]蒋 娟.细菌性阴道病与HIV感染[J].国外医学·皮肤性病学分册,2001,37(4):216-218.
  [4]Iuersen A.k.N./Attermann J./Gerstof J.[A.K.N.lversen,Human lmmunology Unit,Weatherallinst.of Molec.Medicine,John Radcliffe Hospital,ox39AD,oxford,Unitedkingdom]-EUR.J.OBSTET.GY- NECOL,REPROD.BLOL.2004,117/2(227-235).
  [5]BelecL,MattaM,Payan C,et al.Detection ofseminalantibodies to human immunodeficiency virus in vaginal secretions after sexual intercourse: possible means of preventing the risk of human immunodeficiency virus transmission in a rape victim[J].JMed Viro,l,1995, 45(1):113-116.
 

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