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樱桃菌根真菌分离培养条件及有效性(2)

时间:2014-10-24 10:05 文章来源:http://www.lunwenbuluo.com 作者: 刘辉等 点击次数:

  2 结果与分析

  2.1 处理时间和培养基种类的影响

  从图1可以看出,在处理时间一致的情况下,MMN培养基感染杂菌量显著少于PDA、PDA-抗生素培养基;同一种培养基随处理时间的延长感染杂菌量逐渐减少,其中处理时间4、6、8 min感染杂菌的减少量不显著,MMN培养基处理时间6、8 min感染杂菌量相同。从图2可以看出,在处理时间一致的情况下,MMN培养基长菌量显著高于PDA、PDA-抗生素培养基,其中当处理时间为4、6 min时长菌量较多。综合图1、图2数据发现,当MMN培养基在处理时间为6 min时,既能有效抑制杂菌的生长,又能使长菌量达到较高水平。

  2.2 不同温度对菌落直径的影响

  从图3可以看出,当温度为5 ℃时,菌根真菌菌落停止生长。随着温度升高,菌根真菌的菌落直径逐渐增大,当温度升高到25 ℃时,菌落直径达到最大,为原来的4.71倍。当温度继续升高时,菌落直径开始逐渐减小。数据表明,温度对菌根真菌生长影响显著。

  2.3 培养基pH对菌根真菌生长的影响

  由图4可以看出,当pH 2时,菌根真菌停止生长。随着pH的增大,菌根真菌的生长速度逐渐提高,当pH达到7时,菌落直径最大,为4.98 cm。当pH继续增大时,菌落直径开始缓慢减小。当pH为5~10时,菌落直径变化不明显,表明pH对菌根真菌的生长影响在一定范围内不显著。

  2.4 培养基P浓度对菌根真菌生长的影响

  图5表明,在不同浓度P条件下,菌落直径存在一定差异,但总体差异不大。当KH2PO4和K2HPO4分别为0.50 g/L和1.00 g/L时,菌落直径最大。

  2.5 培养基C源对菌根真菌生长的影响

  由图6可以看出,在不同C源条件下,菌落直径存在显著差异,其中当C源为葡萄糖时,菌落直径最小;当C源为可溶性淀粉时,菌落直径最大,比C源为葡萄糖时的菌落直径大0.43 cm。数据表明,不同C源对菌根真菌菌落直径的影响存在差异。

  2.6 培养基N源对菌根真菌生长的影响

  从表1可以看出,在不同N源条件下,菌落直径差异较为明显。当尿素为N源时菌落直径达到最大,当氯化铵为N源时,菌落直径最小。数据表明,不同的N源对菌落直径产生不同的影响。

  2.7 菌根共生体系建立

  通过对樱桃苗根系侵染率及植株成活率进行检测,结果表明,施加菌根真菌的根系侵染率为27.1%,对照组为0;施加菌根真菌的植株成活率为86%,高于对照组的73%。分析结果可知,该菌根真菌经过分离培养仍具有一定的有效性,可以显著提高植株的成活率。

  3 讨论

  通过用PDA培养基、PDA-抗生素培养基、MMN培养基分离该菌发现,三者对该菌的分离具有明显差异。其中,MMN培养基可以有效减少杂菌的感染量,而PDA培养基和PDA-抗生素培养基杂菌感染量均较高,并且MMN培养基能够明显促进该菌的生长,具体作用机理有待进一步研究。HgCl处理时间对根系感染具有明显的抑制作用,其在6 min内能明显减少杂菌感染量,当超过6 min时,这一作用不太明显。与此同时,处理时间也影响该菌的生长,在处理时间较短时,由于杂菌较多会直接影响到该菌的生长,随着处理时间的延长,杂菌感染量减少,促进该菌生长,但过长的处理时间可能会杀死根系内部的真菌孢子,导致该菌生长减缓。

  温度是影响菌根真菌生长的重要因素。一般而言,菌根真菌对温度反应灵敏,20~28 ℃条件下是多数菌根真菌的最适生长温度,而最高耐受温度为35 ℃[11]。该菌的最适温度是25 ℃,但是在35 ℃时仍能生长。通常情况下,菌根真菌喜酸性,在酸性土壤中中接种可以形成菌根[12]。但本研究表明,该菌的最适pH 7,而且在pH 5~10时,pH对该菌生长的影响不明显,这在一定程度上说明菌根真菌的培养与菌根共生体系建立所需要的酸碱环境不一致。P浓度对菌根的形成具有显著的影响,试验证明,当每千克土壤的磷酸二氢钙含量超过6 g时,菌根不能形成[13]。本研究表明,在上述范围内,P浓度对该菌的生长影响不明显。大多数研究表明,不同种类的菌根真菌对C源的利用较为广泛,既可以利用单糖、低聚糖等速效C源,也可以利用淀粉等长效C源。本研究发现,该菌在以可溶性淀粉为C源的培养基中生长最快,其次是蔗糖。本研究发现,该菌对N源的种类要求不高,但以尿素最佳。

  本研究通过对该菌有效性进行检测发现,施加该菌可以提高炼苗期樱桃苗的成活率,因此该菌可以制成菌剂应用于炼苗期樱桃苗,对于其他植物的影响有待进一步研究。同时,该菌的侵染率并未达到对樱桃植株侵染率的最大值,相关原因有待研究。

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