葡萄籽中原花青素的提取的方法分析
时间:2013-08-14 16:24 文章来源:http://www.lunwenbuluo.com 作者:论文部落 点击次数:
1材料与方法
1?1材料
巨丰葡萄籽;原花青素,无水乙醇、乙酸乙酯、丙酮、甲醇、三氯甲烷、水均为分析纯。
1?2设备
食品粉碎机,北京环亚天元机械技术有限公司;722紫外可见分光光度计,上海悦丰仪器仪表有限公司;电子天平,上海卓精BSM—2100;恒温水浴锅,广州威德玛环境仪器有限公司;85-2数显恒温磁力搅拌器;紫花牌循环水真空泵;飞鸽牌系列离心机。
1?3试验方法
1?3?1标准曲线的绘制
分别取原花青素标准液1?00、2?00、3?00、4?00、5?00mL于10mL刻度试管中,加入无水乙醇定容至10mL,塞紧后充分摇匀,制得浓度分别为10?4、20?8、31?2、41?6、52?0ug/mL的标准系列溶液。在500nm处以无水乙醇作空白调零扣除背景值,测定标准系列溶液吸光值A,并绘制原花青素浓度-吸光值标准曲线。溶液中原花青素浓度在10?4~52?0ug/mL范围内,与吸光值A呈线性关系,其回归方程式为A=3?612C-0?032,相关系数r=0?9991。
图1原花青素浓度-吸光值标准曲线
提取率=ncv/m×100%
n 提取剂稀释倍数
c 稀释后提取液中花青素浓度 mg/mL
v 提取剂体积mL
m 葡萄籽质量mg
1?3?2提取时间的确定
准确称取2?00g葡萄籽粉5份(经过石油醚脱脂处理),分别取乙醇溶液(浓度为70%)14mL与之混合,分别于50℃水浴中加热提取30min、40min、50min、60min、70min,自来水冷却至室温,并经离心机离心20min(4 000r/min),最后取上清液测原花青素含量。
1?3?3提取温度的确定
准确称取2?00g葡萄籽粉5份(经过石油醚脱脂处理),分别取乙醇溶液(浓度为70%)14mL与之混合,于30℃、40℃、50℃、60℃、70℃水浴中加热提取30 min,自来水冷却至室温,并经离心机离心20min(4000r/min),最后取上清液测原花青素含量。
1?3?4料液比的确定
分别称取2?00 g石油醚脱脂后的葡萄籽5份,按1:6、1:7、1:8、1:9、1:10的比例与70%的乙醇溶液混合,于50℃水浴中提取30min,自来水冷却至室温,4000r/min离心20min,取上清液测原花青素含量。
2结果与分析
正交试验结果分析,通过单因素试验确定了以浓度为60%的乙醇为提取溶剂,分别选取提取温度、提取时间、料液比为3个因素,每个因素采取3个水平,并以原花青素提取率为参考指标进行L933进行正交试验,正交试验因素水平表及正交试验结果分别见表1。
表1原花青素提取工艺因素水平表
水平因素提取温度(A)℃提取时间(B)min料液比(C)g/mL140401:6250501:7360601:8
三个因素对原花青素提取率影响的主要顺序为:B>A>C,即提取时间>提取温度>料液比,且最佳组合为A3B2C1。即最佳组合为提取温度为60℃,提取时间为50min,料液比为1:6 。
3结论
通过单因素试验和正交试验得到最佳提取条件,即溶剂为乙醇(乙醇浓度为60%)、提取时间为50min、提取温度为60℃、料液比为1:6,此时,原花青素的提取率为3?24。
参考文献
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