摘要:为制定商洛桔梗(Platycodongrandiflorum)种子的质量标准,规范种子供需市场,参考种子净度、千粒重、含水量、种子活力、发芽率等检验规程,对商州A号、商州B号、丹凤、商南和山阳桔梗种子进行品质检验。结果表明,不同桔梗种子净度为52.38%~92.19%,千粒重0.9735~1.0930g,135℃高温法含水量7.53%~7.85%,发芽势55.5%~87.0%,发芽率61.0%~88.0%,发霉率1.33%~5.67%,生活力72.0%~90.5%,活力指数0.0112~0.0243,种子的颜色有黑色和黄褐色两种。商州A号种子在净度、千粒重、发芽能力方面均优于其他4种种子。采用发芽试验与TTC法测定的桔梗种子生活力基本一致。通过对商洛不同县(区)桔梗种子的对比研究,选用种子净度、千粒重、生活力和发芽率为主要分级指标,把商洛桔梗种子初步分成3类,提出了供生产应用的商洛桔梗种子分级标准建议。
关键词:商洛桔梗(Platycodongrandiflorum);种子;品质检验;质量标准
桔梗(Platycodongrandiflorum)别名铃铛花、包袱花、道拉基(朝鲜语)、和尚帽等。李时珍在《本草纲目》一书中说,“此草之根结实而梗直,故名桔梗”。桔梗既是一种资源植物又是一种药、食、观赏兼用的经济植物。它为桔梗科植物,以其干燥根入药,味苦辛,性平,归肺经;具宣肺,利咽,祛痰,排脓等功效,用于咳嗽痰多,胸闷不畅,咽痛,音哑,痢疾腹痛等[1]。
随着桔梗市场需求量的增大,提高其产量和质量对提高我国药农的收入和增加种植地区经济效益都具有重要促进作用。种子作为药材生产的源头,是发展中药材规范化生产的根本,中药材种子的优良与否直接关系到中药材的质量。目前,在桔梗生产中存在出苗率低的现象,这在很大程度上是由种子质量差造成的[2,3]。研究旨在通过对商洛桔梗种子净度、千粒重、含水量、生活力、子粒状况等主要检验指标的测定分析,初步制定桔梗种子的质量分级标准[4],为商洛桔梗药用种植提供一定的参考。
1材料与方法
1.1试验材料
试验用种为2012年3月分别在商州、商南、丹凤、山阳四大桔梗种植县(区)种子站购得。其中,商州购得的种子有两种,购于天士力公司的种子命名为商州A号(公司本地药源基地种植),沙河子种子站提供的为商州B号(当地药农种植)。室温贮藏备用。
1.2方法
1.2.1种子净度检验采用四分法[5]。分别将抽取的2份样品称重,在光洁的桌面上把净度种子、废种子和杂物分开,称量净度种子的重量。3次重复。种子净度=[(种子总重量-杂质重量)/种子总重量]×100%。
1.2.2种子千粒重检验将全部净种子分为4组,从每份中随机取250粒,共1000粒为1组,测定千粒重。3次重复。
1.2.3种子含水量检验105℃恒重法[6]测含水量:称取0.5g整粒种子在烘箱中烘干,测烘干前后的重量差。3次重复。
种子含水量=[(烘前试样重-烘后试样重)/烘前试样重]×100%
135℃高温法:在135℃进行烘干测定,方法同“105℃恒重法”。
1.2.4种子发芽率、发芽势和发芽指数的检验选取桔梗净种子,用水浸种12h后[7],在25℃每天光照12h条件下,放入人工气候箱中培养,每个培养皿中放100粒种子,每组3次重复,测定其发芽状况[8]。
发芽率=(12d发芽总粒数/供试种子粒数)×100%
发芽势=(前7d内发芽种子数/供试种子粒数)×100%
发芽指数(GI)=∑(Gt/Dt)
式中,GI为发芽指数,Gt为t日的发芽数,Dt为发芽时间(d)。
1.2.5种子生活力检验活力指数V=S·GI=S·∑(Gt/Dt)
式中,S为幼苗的生长势,也就是在种子发芽几天后的幼苗干重或平均根长。试验中选取发芽12d后单株幼苗平均干重(105℃恒重法)。
用TTC测定法[9]进行桔梗种子生活力检验。
1)配制。称取0.5g2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)放入小烧杯中,先加少许乙醇溶解,再加
20mL去离子水后用0.1mol/L的NaOH溶液调pH至7.0,再用去离子水稀释定容至100mL,配成的0.5%TTC溶液避光保存。
2)显色。对桔梗种子用水浸种48h,挑选相对饱满健全的种子,用刀片纵切成两瓣,使胚对半分,取半粒放入装有0.5%TTC的试管中,于25℃下染色12h。
3)统计。倒出TTC溶液,再用清水将种子冲洗l~2次,观察种胚被染色的情况。凡种胚全部或大部分被染成红色的即为具有生活力的种子,种胚不被染色的无活力。
1.2.6数据处理与分析采用SPSS13.0软件对试验数据进行处理与分析。
2结果与分析
2.1桔梗种子净度检验结果
从表1可知,商洛不同县(区)的桔梗种子净度相差较大,为52.38%~92.19%之间。商洛桔梗种子净度从高到低为商州A号、商南、丹凤、山阳、商州B号。其中,商州A号种子净度最高,为92.19%;商州B号种子净度最低,含较多杂质,仅为52.38%。最高与最低之间相差39.81个百分点。
2.2桔梗种子千粒重检验结果
从表2可知,商洛桔梗种子的千粒重为0.9375~1.0930g之间。其中,商州A号种子千粒重最高,为1.0930g,最低的为山阳的种子,千粒重仅为0.9735g,最高与最低之间相差0.1195g。丹凤和商南的种子千粒重比较接近,只相差0.03g。
2.3桔梗种子含水量检验结果
从表3可知,商洛不同县(区)桔梗种子的含水量比较稳定。两种测量方法中,135℃下烘7h测得的含水量较高,所以此方法获得的结果较为准确。135℃高温法下商州A号种子的含水量最高,达到了7.85%,而商南种子含水量最低,仅为7.53%。
2.4桔梗种子发芽率、发芽势和发芽指数的检验结果
从表4可知,在25℃下每天光照12h进行发芽试验,其中发芽率最高的是商州A号和丹凤种子,分别达到87.0%和88.0%,而商州B号种子和山阳种子的发芽率较低,只有63.5%和61.0%,最高与最低相差27.0个百分点。通过发芽指数可以看出,商州A号、丹凤和商南3种种子发芽比较整齐,而商州B号和山阳种子的发芽指数分别为19.95和15.50。
从表5可知,不同桔梗种子发霉率为商州B号种子>山阳种子>丹凤种子>商州A号种子>商南种子。其中,商州B号种子发霉率高达6.00%,商南种子的发霉率最低,为1.33%,两者相差4.67个百分点。总体上,商洛桔梗种子的发霉率较低,均小于10%,对发芽试验的准确性影响不大。
2.5桔梗种子生活力检验结果
从表6可知,商洛桔梗种子的活力指数为商州A种子>丹凤种子>商南种子>商州B号种子>山阳种子。活力指数与发芽指数的大小顺序一致,它很好地反映了不同试样点桔梗种子活力的大小。TTC染色法测定的生活力从整体上与活力指数的大小顺序一致,但不同试样点种子染色结果相差较大。用TTC法测得商州A号种子和丹凤种子生活力最高,分别达到90.5%和87.5%,而商州B号种子和山阳种子生活力最低,商南种子以80.0%居中。
2.6数据处理与种子质量分级
试验过程中最稳定、受人为因素干扰最少的是千粒重和发芽率,采用SPSS13.0软件对检测的两组数据进行K聚类分析,结果见表7。从表7可知,统计分析软件把商洛桔梗种子分成3类,商州A号种子和丹凤种子为一类种子,一类种子的最低千粒重为1.0921g,最低发芽率为88%,其余两类也都有各自的数值标准。从最低千粒重来看,一类与三类相差0.1186g,而与二类只相差0.003g。从最低发芽率来看,3个分类标准的梯度良好,平均每个级别之间相差13.5个百分点。
2.7商洛桔梗种子品质检验结果
通过对不同县(区)桔梗种子的检验,从整体上得出商洛桔梗种子品质相关数据:平均净度76.85%,平均千粒重1.0479g,135℃高温法下平均含水量7.65%,平均发芽率75.7%,平均发芽指数22.28,平均发霉率3.47%,平均活力指数0.0181,平均生活力81.0%。
2.8商洛桔梗种子质量分级标准的初步制定
桔梗种子品质分级还没有制定国家和地方标准,参照本试验研究取得的桔梗种子K聚类分析结果,结合其他作物种子质量标准,初步制定商洛桔梗种子质量分级标准(草案)见表8,以供参考。分级方法采用最低定级原则,即任何一项指标不符合规定标准都不能作为相应等级的合格种子。
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