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　　导流杂交是Hybribio的核心技术，其主要原理是主动地将目标分子导向固定在薄膜纤维上抓取探针，再与捕捉的分子进行杂交产生复合物，而其余不受限制的分子将穿过薄膜后被清除，既省时又节约反应物，该技术远优于传统杂交法。HybribioDNA快速杂交仪的设计（获美国专利6，020，187），是基于其发明的"导流杂交"原理（获美国专利5，741，647），使分子间的相互作用，由传统的二唯平面的相互作用提升到三维空间的相互作用。仪器只需少量的样本和试剂，可大大减低运作成本。利用该技术可以一次性检测的HPV亚型包括：①高危亚型：HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68；②低危亚型：HPV6、11、42、43、44；③中国人群常见型：HPV53、66、CP8304，共21种。

　　后两种技术是HPV分型研究，若与HCⅡ这一定量研究联合应用可能对患者的诊治具有更好的指导作用。

　　2HPV疫苗

　　由于HPV在宫颈癌中的重要作用，而HPV感染具有一定普遍性[7]，针对HPV感染的疫苗开发应用和普及成为最近各国研究的焦点[8-10]。上面提到，HPV基因有两种衣壳蛋白：主要衣壳蛋白（L1）和次要衣壳蛋白（L2），而病毒则被这两种结构蛋白包被。当HPV感染人体后，如果机体能够针对HPV衣壳蛋白L1和L2产生中和抗体，就能够预防HPV的感染。

　　2.1预防性疫苗

　　预防性疫苗的原理就是通过重组DNA技术表达LI或LI和L2蛋白，组装成病毒样颗粒（virus-likeparticles，VLPs），诱导机体产生中和性抗体，预防HPV感染。目前有两种疫苗已被美国FDA认证上市：Cervarix疫苗（美国葛兰素史克公司研制），为包含HPV16、18的VLPs；Gardasil疫苗（美国默沙东公司研制），包含HPV16、18、11、6的VLPs。Cervarix疫苗主要用于宫颈癌前病变和宫颈癌的预防，已被获准在10岁以上的女性中使用。Gardasil疫苗用于预防由HPV16、18、11、6型感染引起的生殖器疣以及感染、不典型性病变、癌前病变及癌症，而使用人群的年龄为女性9～45岁及男性9～26岁。这两种疫苗疗效显著，预防HPV短暂或持续感染的疗效达到近100%，并且非常安全，但目前无法了解是否终身有效，所以有待对其接种的远期效果进一步研究。

　　2.2治疗性疫苗

　　除了预防性疫苗，HPV治疗性疫苗也是研究的热点。HPV治疗性疫苗的抗原主要来源于HPV早期蛋白[11]。E6和E7蛋白在诱导和保持细胞恶性表型中起重要作用，宫颈癌细胞不易通过抗原丢失来逃脱免疫作用。因此，E6和E7成为抗原特异性治疗宫颈癌疫苗的理想靶蛋白[12]。目前主要的疫苗类型包括：HPV多肽疫苗、蛋白疫苗、载体疫苗和核酸疫苗。

　　2.2.1HPV多肽疫苗[13-15]其优点是安全纯度高，容易储存和处理，有理想的靶特异性；而缺点为：①存在个体差异性；②免疫原性差。其原理为在离体或是在体的条件下通过促发细胞毒T淋巴细胞（CTL）反应，而对肿瘤细胞起杀伤作用。

　　2.2.2蛋白疫苗其优点为安全、易耐受、有免疫原性。其原理为纯化的病毒蛋白诱导抗体和辅助性T细胞免疫反应以及CTL反应。蛋白疫苗成为目前HPV免疫的研究热点之一。一些蛋白疫苗已进入临床试验阶段。

　　2.2.3HPV载体疫苗[16，17]其原理为将编码病毒蛋白基因整合至机体细胞中，由机体细胞再合成病毒蛋白，从而引发一系列的免疫应答反应，。

　　2.2.4核酸疫苗其优点为能从多方面提高免疫反应，并且制备简单，易储存、成本低，可以通过多种途径免疫接种。其原理为编码蛋白的核酸结构与自然感染途径表达的蛋白一样被机体加工处理，从而启动了针对该抗原的体液及细胞免疫的一种疫苗[18-20]。

　　3树突状细胞免疫治疗

　　树突状细胞（dendriticcell，DC）为抗原提呈细胞，是体内唯一能激活T细胞免疫的细胞，而肿瘤的细胞免疫主要是T细胞免疫，在HPV相关肿瘤局部增加DC数量可明显抑制肿瘤进展。

　　DC广泛分布于除脑以外的组织和器官，但数量较少，仅占外周血单核细胞数的不足1%，最初是从小鼠脾组织中分离发现的，因其形态具有树突样突起而命名。DC的主要功能是摄取、处理传递和提呈抗原，通过激活T淋巴细胞而启动特异性免疫。成熟的DC还能分泌IL-12等细胞因子，上调趋化因子的表达水平，启动特异性T淋巴细胞免疫反应。因此，DC的肿瘤免疫治疗广泛应用于各种恶性肿瘤的治疗研究。

　　通过对肿瘤免疫机制的研究，预防性疫苗对HPV感染的保护作用，而HPV疫苗这种特异性免疫治疗将对宫颈癌的预后产生重大改善，从而最大限度的限制宫颈癌的发生以及提高患者的生存质量及时间。

　　[参考文献]

　　[1] Walboomers JM. Human papillomavirus is a necessary cause of invasive cervical cancer worldwide[J]. J Pathol，1999，189（1）：12-19.
　　[2] Galani E，Christodoulou C. Human papilloma viruses and cancer in the post-vaccine era[J]. Clin Microbiol Infect，2009，15（11）：977-981.
　　[3] Bosch FX，Burchell AN，Schiffman M，et al. Epidemiology and natural history of human papillomavirus infections and type-specific implications in cervical neoplasia[J]. Vaccine，2008，26（Suppl 10）：1-16.
    [4] Lrincz AT. Screening for cervical cancer：new alternatives and research[J]. Salud Publica Mex，2003，45（Suppl 3）：376-387.
　　[5] Cuzick J，Arbyn M，Sankaranarayanan R，et al. Overview of human papillomavirus-based and other novel options for cervical cancer screening in developed and developing countries[J]. Vaccine，2008，26（Suppl 10）：29-41.

　　[6]范文生，杨怡卓，吕亚莉，等.基因芯片技术检测宫颈病变中HPV感染的临床研究[J].中华医院感染学杂志，2009，9（7）：745-747.