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　　[摘要]宫颈癌是世界范围内第二大常见妇科肿瘤，每年有>230000人死于宫颈癌。导致宫颈癌的危险因素主要为持续性高危型人乳头状瘤病毒感染宫颈的移行带上皮，其机制可能是机械性原因，也可能是生物性原因。通过免疫干预可以打破免疫耐受，重新激发机体免疫系统消除肿瘤细胞的能力，随着免疫学和基因工程学的发展，免疫治疗已成为临床肿瘤治疗的第4种治疗模式。本文对近年来宫颈癌的HPV相关筛查和免疫治疗进展进行综述。

　　[关键词]HPV；宫颈癌；免疫治疗

　　[中图分类号]R711.74[文献标识码]A[文章编号]1673-9701（2013）28-0019-03

　　宫颈癌是世界范围内第二大常见妇科肿瘤，而在发展中国家妇女中其发病率位居第一[1]，且发病年龄年轻化。人类乳头状瘤病毒是宫颈癌的主要危险因素，且其分型与宫颈浸润癌间有明显的相关性，故HPV的检测及为重要[2]。继传统手术、放化疗后免疫治疗已经成为治疗宫颈癌的新观点被大家所接受。本文对近年来宫颈癌的HPV相关筛查和免疫治疗进展进行综述。

　　1人类乳头状病毒（humanpapillomavirus，HPV）

　　1.1HPV结构与功能

　　HPV是一种球形无包膜的环状双链DNA病毒，在核内复制，并形成有20面衣壳的无胞膜病毒颗粒。HPV基因组包含三个区，其中有两个编码区，即早期基因区和晚期基因区，可产生两类蛋白。具体包括：

　　1.1.1早期区（E区）长约4kb，含8个开放读码框架（ORF），编码DNA复制所需的非结构蛋白，编码的病毒蛋白依次为：E6、E7、E1、E8、E2、E4、E3和E5。E6和E7主要与细胞转化及HPV的致癌性有关，编码的E6、E7蛋白引起宫颈上皮细胞永生化。E6与野生型P53结合，促进其降解。导致P53抑制细胞生长的功能丧失；E7结合Rb基因并抑制其活性，导致DNA合成增加。以上两种结果均使宿主细胞的细胞周期失控；E1参与病毒复制，其蛋白具有ATP依赖性解旋酶活性；E2编码转录因子，参与转录调节的主要功能是抑制E6和E7的表达。E6和E7的过表达会使细胞持续保持增殖能力，却丧失掉分化能力。而完整的病毒颗粒（需要衣壳蛋白的组装），只能产生在已经分化/开始角化的细胞中，故为了保证不断产生完整的病毒颗粒（所有生物的本质特性之一都是尽可能繁殖最多的后代），E2始终与E6和E7相互作用，让细胞保持在病毒基因表达和宿主细胞分化的平衡点上；E4编码晚期胞质蛋白，其表达产物可与细胞骨架蛋白相互作用并介导病毒组装，与病毒的成熟有关，它在分化型细胞中表达最强，能结合并破坏细胞角质蛋白网，形成凹空细胞（koilocyte）；E5具有较弱的转化活性，其表达产物可下调HLA-1的表达，刺激细胞生长。

　　1.1.2晚期区（L区）长约3kb，含L1和L2。这两个晚期读码框主要编码HPV的衣壳蛋白。L1高度保守，为种特异性抗原；L2高度可变，是型特异性抗原。L2蛋白也是免疫组化技术确定HPV感染的主要识别位点。

　　1.1.3上游调节区（upstreamregulatoryregion，URR区）为非编码区（noncodingregion，NCR区），长约1kb，主要作用为控制早、晚转录区的转录和病毒颗粒的合成，其位置位于E基因始端与L区末端之间。

　　1.2HPV分型与检测方法

　　HPV具有高度宿主细胞特异性，可引起人类多种增殖性上皮病变，包括乳头状瘤（疣）和瘤样病变。目前已知的HPV病毒超过百种，感染生殖道的HPV超过40种。绝大多数的宫颈癌与HPV感染有关。HPV感染率在人群中虽然比较高，但大多感染是自限性的。HPV感染后病灶可以是多灶性、多中心性及一种以上HPV病毒感染。HPV6、11型是常见的低危亚型，主要与良性外生性生殖道疣和尖锐湿疣有关。HPV16、18、31等为高危类型，见于各级别CIN病变及宫颈癌[3]。HPV16是宫颈鳞状细胞癌常见感染类型，HPV18是宫颈腺癌常见类型。

　　最近研究发现，连续的同一类型高危型HPV感染所形成的HPV感染更容易造成宫颈癌的进展。这些研究结果促使高危型HPV的检测广泛应用于临床工作中，其重要意义包括：宫颈癌和其癌前病变的筛查，对ASCUS患者的分流管理，CIN治疗后残留或复发病变的预测和随访标志物，辅助细胞学对宫颈病变的日常筛查工作，以及指导HPV疫苗的研究和使用。HPV基因分型和定量研究对提高临床诊断具有重要意义[4，5]。目前HPV核酸检测技术主要包括杂交捕获试验（HCⅡ）、聚合酶链反应（PCR）、原位杂交、DNA印迹杂交、低密度基因芯片导流杂交技术等，这些技术会对HPV与宫颈癌之间关系的基础和临床研究提供有力的工具。下面就最近常用的检测技术简单介绍。

　　杂交捕获试验（HCⅡ）是目前临床广泛应用的检测HPV感染的重要方法，它可以确定待测的HPV-DNA含量，其优点是方法标准化，检测效率高；缺点是不能对HPV分型，但当任何一种类型的HPVDNA超过阈值，检验的结果为阳性。一定要正确解读HCⅡ的检测结果：≥1说明阳性，即感染了HR-HPV，但结果中的数值大小并不与病变的严重程度呈正比；<1说明阴性，表示未检测出所有13种HR-HPVDNA或样本中不存在HR-HPVDNA，但不能完全除外存在极少量、未能被检测出来的HR-HPVDNA。例如处于潜伏感染状态的HPV，其DNA拷贝维持在一个很低的水平，常常难以被检测到；如果低于但接近1.0，而且可疑HR-HPV感染应当重新采集样本再次检测。

　　亚能人乳头瘤病毒分型基因芯片检测系统是一种PCR-反向点杂交技术，其优点是高灵敏度、高特异性、高通量，重复性好[6，7]，它一次性检测HPV15种最常见高危基因型，依次为：HPV16、18、45、31、33、52、58、35、59、56、39、51、73、68、82（这也是2003年世界卫生组织国际癌症研究所（IARC）根据HPV相对危险度公布的15最常见高危基因型）。对模板DNA的纯度要求低，不需要分离病毒或细菌，无需培养细胞，DNA粗制品即可作为扩增模板，可检测不同来源的标本，包括宫颈脱落细胞、液基细胞学标本、疣体组织、石蜡组织切片等粗制的DNA作为模板进行扩增。