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   摘要 MYB转录因子在植物生长发育和响应外界环境胁迫中发挥着重要的作用。为了分析小麦MYB基因在小麦不同组织中的表达特性，采用半定量RT-PCR方法研究了小麦MYB基因在根、茎和叶中的表达。结果表明：MYB的转录本在3个组织中均有表达，在根中MYB表达量最高，叶中表达量最低。
　　关键词 小麦；MYB 基因；表达
　　中图分类号 S512.1 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2014）01-0029-01
　　干旱、盐碱和极端的温度等非生物胁迫严重影响小麦的分布和产量，提高小麦对非生物胁迫的耐受性已经成为小麦育种的主要目标。利用转基因的方法，将一些优良的抗逆基因转化小麦，是提高小麦抗逆能力的一个主要方法。
　　MYB转录因子在应答非生物胁迫中具有重要作用，例如TaMyb2-Ⅱ基因受干旱胁迫诱导表达[1-2]。TaMYB32基因受高盐胁迫诱导[3]。在前期克隆小麦MYB基因的基础上[4]，分析在小麦不同组织中MYB基因的表达情况，为进一步研究基因的功能奠定试验基础。
　　1 材料与方法
　　1.1 试验材料
　　挑选大小均匀的小麦种子30粒，用75%的酒精消毒1 min，用无菌水冲洗后，置于培养皿中，加入去离子水。在光照培养箱中20 ℃培养，生长20 d后，取根、茎和叶片，经液氮速冻后，于-70 ℃保存备用[5]。
　　1.2 试验方法
　　用TRIZOL试剂盒（TIANGENG）提取根、茎、叶组织的总RNA。利用AMV反转录酶（TaKaRa）发转录合成cDNA第1链。以分别转录的根、茎和叶组织总RNA为模板进行RT-PCR，RT-PCR反应体系和程序参见于月华等[4]。
　　采用半定量RT-PCR方法，以小麦的根、茎和叶组织cDNA第一链为模板，检测MYB基因在3种组织中的表达情况。扩增引物为：F：5′-AACGCCGTCAAGAATCACT-3′和R：5′-GAAGAAACCGCCACCACTA-3′。以小麦actin基因为内参基因[1]。扩增体系为20 uL，扩增程序为：94 ℃预变性10 min，94 ℃变性30 s→60 ℃复性45 s→72 ℃延伸1 min，28个循环，72 ℃延伸10 min[6]。
　　2 结果与分析
　　利用半定量RT-PCR，分析在小麦根、茎和叶组织中MYB基因的表达特性。结果表明，该基因在上述3种组织中均有表达（图1）。利用Quantity One软件对电泳结果进行定量分析，表达量大小依次为根、茎和叶。