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　　4生物碱的细胞毒活性

　　采用MTT法[17]对分离得到的15个生物碱单体化合物进行人早幼粒细胞白血病HL-60细胞毒活性测试。于96孔培养板的孔内加入180μL密度为2×104个/mL的HL-60细胞悬液，然后向相应孔中加入不同浓度的样品，继续培养48h，小心吸去药液，然后在每一孔内分别加入90μL新鲜培养基和10μLMTT（5g·L-1），于37℃温育4h，吸去上清液，加入DMSO100μL后，于平板摇床上，振摇5min。最后在酶标仪上测出570nm处吸光度（A）。样品的终浓度分别为1×10-5，1×10-6，1×10-7mol·L-1，每个浓度设3个复孔，另设阳性对照药（阿霉素）和空白对照各一组。以溶剂对照处理肿瘤细胞为对照组。由A计算抑制率：细胞生长抑制率=（1-A样品组/A对照组）×100%。结果表明，在1×10-5mol·L-1的条件下，化合物7～10，13和14对HL-60癌细胞体外生长的抑制率分别是51.36%，59.09%，52.51%，53.93%，51.43%和64.31%，显示出较强的体外细胞毒活性。其他化合物在同等摩尔浓度的条件下对HL-60癌细胞几乎无体外细胞毒活性。

　　5讨论

　　目前，莲属植物被归属于睡莲科，但部分学者[18]从莲属植物的形态学、解剖学、细胞学、孢粉学、胚胎学、植物化学、分子生物学及花器官发生等多方面与睡莲科植物进行了对比研究，支持莲属植物单独成科。从已报道的文献看，睡莲科其他属植物不含生物碱类成分，本文从荷梗中分离得到一系列生物碱类成分，从化学成分的角度支持莲属植物单独成科。

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　　CytotoxicalkaloidsfromstemsofNelumbonucifera

　　DUANXu-hong1，PEILin1*，JIANGJian-qin2

　　（1.HebeiProvinceChineseMedicineResearchInstitute，KeyLaboratoryTurbidity

　　ToxicSyndromeofHebeiProvince，Shijiazhuang050000，China；

　　2.DepartmentofNaturalMedicinalChemistry，ChinaPharmaceuticalUniversity，Nanjing211198，China）

　　[Abstract]ChemicalinvestigationwascarriedouttostudythealkaloidsfromstemsofNelumbonuciferaandtheircytotoxicactivities.Theconstituentswereseparatedbycolumnchromatography，andtheirstructureswereelucidatedbyspectroscopicdataanalyses.TheisolatedcompoundswereevaluatedfortheircytotoxicactivitiesbyMTTmethod.Fifteencompoundswereisolatedfromthetotalalkaloidsextractandidentifiedasasimilobine（1），isococlaurine（2），N-acetylnorarmepavine（3），crykonisine（4），velucryptine（5），pycnarrhine（6），liriodenine（7），nuciferine（8），nornuciferine（9），armepavine（10），N-methylasimilobine（11），coclaurine（12），N-norarmepavine（13），N-methylcoclaurine（14）andlysicamine（15）.Compounds1-7and12-15wereisolatedfromstemsofthisplantforthefirsttime，andcompounds2-6werefirstlyisolatedfromthefamilyNelumbonaceae.Compounds7-10，13and14showedsignificantcytotoxicactivitiesagainstHL-60carcinomacelllinewithinhibitoryratiosof51.36%，59.09%，52.51%，53.93%，51.43%，and64.31%atconcentrationof1×10-5mol·L-1，respectively.

　　[Keywords]Nelumbonucifera；stemsofNelumbonucifera；alkaloids；cytotoxicactivities

　　doi：10.4268/cjcmm20132323